腾博会唯一官方

<cite id="xz27z037ya"></cite><cite id="xz27z037ya"></cite><cite id="xz27z037ya"></cite><cite id="xz27z037ya"></cite>
  • <cite id="xz27z037ya"></cite><cite id="xz27z037ya"></cite><cite id="xz27z037ya"></cite><cite id="xz27z037ya"></cite>
  • <cite id="xz27z037ya"></cite><cite id="xz27z037ya"></cite><cite id="xz27z037ya"></cite><cite id="xz27z037ya"></cite>
  • 腾博会唯一官方

    犬皮肤及软构造肿瘤的病理构造学察看及COX -腾博会唯一官方-tengbo168手机版-腾傅会国际官网-2的表达

    择要: 为讨论犬皮肤及软构造构造中环氧合酶-2(COX-2)卵白的表达与皮肤及软构造肿瘤的发作干系,我们起首对临床上搜集到的12例犬皮肤及软构造肿瘤停止了构造病理学分类,然后接纳免疫组化办法检测了12例皮肤及软构造肿瘤构造及6例正常皮肤构造中COX-2的表达状况。后果表现:12例犬皮肤及软构造肿瘤中良性肿瘤9例,占75%;恶性肿瘤3例,占25%。在9例良性肿瘤中基内幕胞瘤1例,纤维瘤1例,血管周细胞瘤1例,皮脂腺瘤2例,皮脂腺上皮瘤2例,毛母细胞瘤2例;在3例恶性肿瘤中皮脂腺癌2例,脂肪赘瘤1例。COX-2在犬皮肤及软构造肿瘤中的阳性表达次要位于肿瘤细胞的胞浆内及胞核四周,为棕黄色颗粒,12例皮肤及软构造肿瘤中7例COX-2呈强阳性表达,阳性表达率为58.3%(7/12),正常皮肤中COX-2均无表达。因而,COX-2在犬皮肤及软构造肿瘤中的表达可作为犬皮肤及软构造肿瘤诊断的根据之一。

    要害词:犬;皮肤及软构造;肿瘤;病理构造;免疫组化;环氧合酶-2

    随着我国宠物犬的养殖数目不时添加,种种犬病的发作率也不时上升,此中犬的肿瘤性疾病也在日渐增多,现在尚未遭到宠物主人的注重。犬的皮肤肿瘤在临床上最罕见,约占肿瘤范例的33%[1]。

    非甾体抗炎药物经过克制环氧合酶(Cyclooxygenase  COX)的活性,从而克制花生四烯酸生物分解前线腺素(Prostaglandin  PG),PG产品用来到场机体的多种生理和病理进程,COX是花生四烯酸代谢的限速酶,分为两个亚型 COX-1和COX-2。COX-1在构造细胞中是构造性表达,到场构造的正常生理进程,而COX-2是一种诱导酶,在正常构造中很少有表达,在构造毁伤和炎症状况下呈高表达。

    现在国际关于犬肿瘤的医治在接纳手术摘除后,大少数病例没有失掉确诊,因而犬肿瘤疾病的复发和转移比拟罕见。免疫构造化学办法在人类肿瘤疾病的诊治和研讨中发扬偏重要的作用,但在犬肿瘤疾病的研讨上还处于起步阶段,而COX-2与犬肿瘤的干系现在国际报道较少。笔者以临床天然发作的犬皮肤及软构造肿瘤病料作为研讨工具,对肿瘤停止病理构造学察看,并用免疫构造化学的办法对COX-2在犬皮肤及软构造肿瘤上的表达停止察看,为犬皮肤及软构造肿瘤的临床防备、诊断、医治和预后提供牢靠的临床根据。

    1. 资料与办法

    1.1资料

    1.1.1病料    患犬泉源于浙江大学植物医院,经过病史观察及临床反省,开端确定为患有皮肤及软构造肿瘤,经过手术摘除肿瘤,分红巨细约1 cm3左右的小构造块,用10%中性福尔马林溶液停止牢固。另取犬正常皮肤构造6份作为比较。

    1.1.2次要试剂   一抗为小鼠COX-2单克隆抗体(Santa Cruz公司)、 二抗为山羊抗小鼠IgG抗体(Abbike公司)、磷酸盐缓冲液( PBS)(杭州流行水上生物科技无限公司)、二氨基联苯胺( DAB)显色试剂盒(北京中山生物技能无限公司)、SP免疫组化试剂盒(北京中山生物技能无限公司)。

    1.2办法

    1.2.1病理构造切片制造  将手术摘除的肿瘤修整为巨细约1 cm3 的构造块并牢固于10%中性福尔马林溶液中,要求从被膜到深部构造切取完好而片面的构造块,以表现构造器官的完好性。构造块辨别颠末洗濯、脱水、通明、浸蜡、包埋、切片和HE染色。之后依照WHO对犬乳腺肿瘤的分类规范对被检肿瘤停止分类。

    1.2.2免疫组化染色  将白腊切片惯例脱蜡、水化;3%H2O2溶液室温孵育10 min;蒸馏水冲洗,PBS浸泡5min;柠檬酸缓冲液微波加热至95 ℃~98 ℃修复抗原10 min;PBS缓冲液水洗,加一抗,37℃,湿盒内孵育1 h;PBS缓冲液水洗,加二抗,37 ℃,湿盒内孵育0.25 h;PBS缓冲液水洗;滴加新颖配制DAB显色液,室温孵育20 min;蒸馏水充沛冲洗;复染、脱水、通明、封片。

    1.2.3后果断定   COX-2 阳性表达次要是在细胞浆内及细胞核四周特异性的显色出棕黄色颗粒。每张切片辨别察看5个视野,综合染色强度和阳性细胞数散布停止半定量剖析,此中染色强度评分规范如下:未染色为0分,淡染色为1分,分明染色为2分,强染色为3分;阳性细胞数散布评分规范如下:没有阳性细胞数为0分,阳性细胞数<25%为1分,25%-50%为2分,51%-75%为3分,>75%为4分,将两项评分相加,<1分为阴性表达,2-3分为阳性表达,>3分为强阳性表达[2,3]。

    2. 后果

    2.1病理构造学分类   依据WHO对犬肿瘤的分类规范将所搜集的12例皮肤及软构造肿瘤停止分类[4]。此中良性肿瘤9例,占75%;恶性肿瘤3例,占25%。在9例良性肿瘤中基内幕胞瘤1例,纤维瘤1例,血管周细胞瘤1例,皮脂腺瘤2例,皮脂腺上皮瘤2例,毛母细胞瘤2例;在3例恶性肿瘤中皮脂腺癌2例,脂肪赘瘤1例(表1)。

    表1  12例犬皮肤及软构造肿瘤的病理范例散布


    2.2病理构造学察看   皮脂腺癌镜下可见分叶内的瘤细胞有两种: 一种为未分解的上皮细胞,形似基内幕胞瘤的细胞。镜下可见细胞界线含糊,核圆形或椭圆形,胞浆内较少有粉白色细颗粒状或含单个脂滴空泡,;另一种为成熟的皮脂细胞, 形体较大,呈多边形, 胞浆丰厚, 内含有数小空泡,核较小, 位于细胞地方或偏于一侧,有分明的核破裂相(图1-1)。脂肪赘瘤镜下可见少量增殖的胞膜明晰,近于圆形的细胞,胞浆内见有空泡,细胞形状巨细不等,核较大,偏于细胞一侧,并可见较多的核异型性(图1-2)。基内幕胞瘤镜下可见肿瘤细胞成团块状增殖,由结缔构造联系为不规矩小叶状,细胞呈梭形、多边形及近圆形,细胞核圆形,核膜明晰,无分明核破裂相(图1-3)。纤维瘤镜下可见高度增生的真皮,弥散性结缔构造增生,呈无规矩交织陈列,次要是散在的成纤维细胞和成熟的结缔构造纤维细胞,(图1-4)。血管周细胞瘤镜下可见一个或多个细胞构成管外形,血管四周有增殖的梭形细胞,相似成纤维细胞(图1-5)。皮脂腺瘤镜下可见真皮内的瘤构造呈巨细、形状纷歧的分叶, 其四周盘绕薄层结缔构造包膜,分叶内少量未分解的腺上皮细胞和成熟的腺上皮细胞增殖,核异型性不高(图1-6)。毛母细胞瘤镜下可见瘤细胞泉源于毛囊基内幕胞,细胞胞浆较少,胞核浓染,增生的细胞被包膜包裹,构成相似于毛囊的构造(图1-7)。皮脂腺上皮瘤镜下可见界限不清、不规矩生长的细胞团块,呈腺样散布,可与表表面连,无包膜,相似基内幕胞瘤,一局部细胞已分明向皮脂腺分解,而大局部为未分解的细胞(图1-8)。

    2.3COX-2 在犬皮肤及软构造肿瘤中的表达    COX-2在犬皮肤及软构造肿瘤中的阳性表达次要位于肿瘤细胞的胞浆内及胞核四周,为棕黄色颗粒。12例皮肤及软构造肿瘤中7例COX-2呈强阳性表达(见图2-1,2-2,2-3,2-4),阳性表达率为58.3%(7/12),正常皮肤中COX-2均无表达(表2)。

    表2  COX-2在差别皮肤及软构造肿瘤上的表达状况


    3.讨论

    3.1犬皮肤及软构造肿瘤手术办法及留意点瘤体较小者,只管即便沿瘤体四周作梭形隐语,缝适时对创口停止修剪,防止两头在缝合后构成“狗耳朵”。当隐语张力较大时,充沛剥离皮下构造,用可吸取线无张力分层缝合。关于因瘤体过大而切除过多构造的创口,在手术前要设计好皮瓣,将皮瓣与创面边沿缝合,须要时安排引流条[5]。在切除原发性肿瘤时,应将左近的部分淋逢迎摘除,以避免转移[6]。

    3.2犬皮肤及软构造肿瘤病理构造学辨别   从瘤体形状看,普通状况下皮肤良性肿瘤界线明晰,有包膜,表面规矩,生长迟缓,无压痛,无分明底子。而恶性肿瘤外表高低不屈,多呈菜花状,增长敏捷,瘤体常呈现出血坏去世,有底子,四周构造会伴发肿胀痛苦悲伤[7]。

    皮肤肿瘤次要是由于皮肤的正常构造构造如上皮构造、脂肪构造、纤维结缔构造以及一些肥大细胞等在致病要素下呈现的非常增殖。皮肤的隶属构造和隶属腺体如毛囊和皮脂腺也是皮肤肿瘤的好发部位[8]。

    依据构造泉源差别WHO对犬皮肤及软构造肿瘤停止分类,包罗上皮性肿瘤如基内幕胞瘤、基内幕胞癌、皮肤乳头状瘤、鳞状细胞癌、毛母细胞瘤、毛发上皮细胞瘤、毛母质瘤、皮脂腺瘤、皮脂腺癌、皮脂腺上皮瘤、汗腺瘤、汗腺癌、耵聍腺瘤、耵聍腺癌、玄色素细胞瘤、恶性玄色素瘤;间质肿瘤如纤维瘤、纤维赘瘤、粘液瘤、粘液赘瘤、血管周细胞瘤、神经鞘瘤、脂肪瘤、脂肪赘瘤、血管瘤、血管赘瘤、淋巴管瘤、淋巴管赘瘤;圆细胞瘤如肥大细胞瘤、构造细胞瘤、浆细胞瘤、淋巴瘤、犬感染性性肿瘤。本实验共发明皮脂腺癌、脂肪赘瘤、基内幕胞瘤、纤维瘤、血管周细胞瘤、皮脂腺瘤、皮脂腺上皮瘤、毛母细胞瘤等8种肿瘤范例。

    3.3COX-2与犬皮肤及软构造肿瘤的干系  

    现在少量研讨证明COX-2在消化道肿瘤、乳腺癌、泌尿生殖道肿瘤中存在高表达,使得COX-2与肿瘤的干系遭到了人们的注重,曾经理解到的致瘤机理次要有:安慰肿瘤细胞增殖、克制肿瘤细胞凋亡、克制机体免疫反响、促进肿瘤重生血管构成、以及添加肿瘤细胞的侵袭性和转移才能等。

    检测COX-2在皮肤肿瘤构造中表达和植物学实行等方面的证据标明,COX-2与皮肤肿瘤的发作开展有亲密干系。有材料研讨标明COX-2在很多皮肤癌前病变中存在表达,而在正常皮肤中的表达较少,阐明COX-2的表达可作为皮肤癌的晚期诊断[9,10]。有研讨证明 COX-2 的过表达与多种皮肤肿瘤的发作开展有着亲密干系[11,12]。材料研讨发明在人和植物模子的皮肤肿瘤中,COX-2在皮肤原位癌和鳞状细胞癌构造中表达分明上升,从而以为COX-2的表达可作为鳞状细胞泉源的皮肤肿瘤的提示[13]。汪雁等研讨发明COX-2在皮肤基内幕胞癌中的阳性表达率为60.3%,与其在正常皮肤构造中的表达差别明显,提示COX-2的表达与皮肤基内幕胞瘤的发作开展有关[14]。华海康经过对118例皮肤肿瘤构造和20例正常皮肤构造中 COX-2 的表达,发明在差别皮肤肿瘤构造中COX-2的表达率差别,而正常皮肤中表达为阴性[15]。